湿热蒸气灭菌验证如下。
①热电偶校验。用油浴、标准温度计、加热器等校验热电偶温标的准确度，其误差应在士0.5℃以内才能使用。
②测量箱、阱内部的温度场，找出其最冷点的位置。试验时测温热电偶不得少于10个，将其分布在箱、阱内具有代表性的表面上可能的最冷点和灭菌最困难的位置，灭菌控制器的时间应调节到确保所有安装点的温度在121℃以上最少维持15min。因为这是国际公认的标准。按所设定的灭菌温度（≥121℃）和灭菌时间（≥15min）连续灭菌3次。用试验所得的数据进行统计分析。找出冻干箱内最冷点的位置，保温阶段至冷却开始时，最冷点温度和腔室平均温度间的差值不应大于士2.5℃。
③生物指示剂挑战试验。一般可用5个以上的耐热板，每1cm2板上培养10‘个耐热杆菌孢子作生物指示剂，放置于箱、阱内的搁板上或壁面上可能的最冷点处。经121℃保温30min灭菌，而后按中国药典“无菌检查法”作无菌检查。若呈阴性，则确认灭菌完全；若呈阳性，则蒂查找灭菌不完全的原因。调整灭菌程序，延长灭菌时间，重新验证。
④验证在灭菌的全过程中，箱、阱内是维持正压的，因为不允许外界非无菌空气进人灭菌腔室危及其无菌。在箱、阱排水时，排水管向外界的阀门是打开的，应防止有外界空气流人。
⑤验证灭菌腔室的附件、仪表、密封材料对高温高压灭菌的适应性。医药冻干机箱、阱及箱内金属件，一般采用不锈钢制造。
不锈钢的腐蚀大多数情况下是由于在热湿环境下氯离子对不锈钢材料的晶间腐蚀，特别是含氯化物溶液，在高温高压热湿环境中，不锈钢表面钝化膜将被腐蚀。00Cr17Ni14Mo2（美国牌号316L）
不锈钢具有较强的抗晶间腐蚀能力，而0Crl8Ni9（304）则较差。
有关零部件材质的性能，是用查验供应商提供的关于这些材料的材质检验报告来验证的。
箱、阱的门、窗密封，压塞系统、连接阀门等的密封对高温蒸气的耐受能力是由查验密封材料的材质性能和现场检漏来验证的。
⑥保护装置的可靠性。湿热蒸气灭菌是一种压力容器操作，必须设计和装备一系列安全保护装置，验收时应查验其动作的可靠性。
a.箱门未锁定，灭菌蒸气进气阀门应打不开。
b.箱内压力超过环境压力，箱门的锁定装置应打不开。
c.箱内压力超过第一设定值（如0.11MPa），进蒸气阀门应关闭，并发出声光报警。
d.箱内压力超过第二设定值（如0.13MPa），进蒸气阀门应再次关闭，并有声、光报警。
e，箱内压力达到第三设定值（如0,18MPa），机械式安全阀门打开放气。
